Nevertheless, she did examine the DNA sequence of the acetylcholinesterase gene, which encodes the enzyme targeted by organophosphate insecticides. I had thought it was the most likely candidate for the resistance gene on the third chromosome, which I had mapped to around III-50. For resistant strains of Drosophila melanogaster, she used a DNA sequencing method called direct sequencing to analyze the acetylcholinesterase gene in genomic DNA, focusing specifically on the template strand used during transcription. In this process, she found that the same point mutations that had been reported by French researchers to cause resistance-associated amino acid substitutions were also present in the acetylcholinesterase gene of the resistant strain that I had actually used in my graduate research. In other words, the resistant strains that I had established to study the Katsunuma population of D. melanogaster also carried point mutations in the acetylcholinesterase gene that confer resistance to organophosphates. This strongly suggested to me that the resistance gene on the third chromosome might be a resistant form of acetylcholinesterase.
(translated version of the post on October 30, 2021)
それでも、第3染色体上の抵抗性遺伝子について、私が位置決定した~III-50近辺にある、抵抗性遺伝子としてもっとも有力な候補であると思われた、有機リン剤が相互作用する作用点であるアセチルコリンエステラーゼの遺伝子の塩基配列について調べてくれていました。抵抗性系統のショウジョウバエについて、ダイレクト・シ－クエンシングといわれる塩基配列分析法を用いて、ゲノムDNA上の、アセチルコリンエステラーゼ遺伝子の転写の際に鋳型となる、DNAとしての機能をもっている鋳型鎖の方の塩基配列を決定してくれていました。そのなかで、フランス人研究者たちが同定した抵抗性型のアミノ酸置換をもたらす点突然変異を、私の研究の中で実際に用いていた抵抗性系統のアセチルコリンエステラーゼの塩基配列の中にも見出してくれていました。つまり、私たちが勝沼のショウジョウバエ集団を研究するために作製した抵抗性系統にも、有機リン剤に対して抵抗性をもたらすような点突然変異がアセチルコリンエステラーゼの塩基配列の中にもみられたことになり、第3染色体上の抵抗性遺伝子は抵抗性型のアセチルコリンエステラーゼである可能性が強く示唆されたことになります。
(2021年10月30日のポストを再掲）